糞大腸菌群是一個公共衛(wèi)生問題重點關(guān)注的目標(biāo),受糞便污染的水、食品、化妝品和土壤等物質(zhì)均帶有大量的的這一類菌群。若檢測糞大腸菌群即表明已被糞便污染。因此 對這類菌群的檢測十分很有必要,檢測方式有很對,今日西安海研程控定量封口機(jī)廠家就來給各位介紹的是酶底物法檢測糞大腸菌群的步驟。
1、取100ml樣品或者稀釋樣品與滅菌后的三角瓶,再添加2.7克+-0.5克培養(yǎng)基粉末,在充分?jǐn)嚢杌靹?/span>,等完全溶解,在將其全部倒入97孔定量盤內(nèi),以手扶平97孔定量盤背面,趕出孔內(nèi)氣泡,然后,用程控定量封口機(jī)封口。
2、培養(yǎng)測定糞大腸菌群時,將封口后的97孔定量盤,放入恒溫培養(yǎng)箱中,在44.5攝氏度+-0.5攝氏度下,培養(yǎng)24小時。
3、陽性與陰性對照
將糞大腸菌群標(biāo)準(zhǔn)菌株制成300-3000個/ml的菌懸液,將菌懸液按接種和培養(yǎng)要求操作,陽性菌株應(yīng)呈現(xiàn)陽性反應(yīng);陰性菌株應(yīng)呈現(xiàn)陰性反應(yīng);否則,結(jié)果無效,實驗失敗,重新測定。
4、結(jié)果判讀及計數(shù)和有效位數(shù)的要求
將培養(yǎng)24小時的97孔定量盤進(jìn)行結(jié)果讀數(shù),樣品出現(xiàn)變黃色判斷為糞大腸菌群陽性。測定結(jié)果保留2位有效數(shù)字。
5、結(jié)果計算與表示
從97孔定量盤法MPN表中查的每100ml水樣中糞大腸菌群的MPN值,在根據(jù)樣品稀釋度不同,按照公式換算樣品中糞大腸菌群濃度。