采用酶底物法對地表水水樣進行不同倍數(shù)的稀釋后進行培養(yǎng)檢測,觀察地表水結果變化。結果表明:地表水水樣稀釋倍數(shù)越小,結果越準確。采用酶底物法測定地表水中的糞大腸菌群具有快速、簡便的特點,準確掌握水樣稀釋倍數(shù)對測定結果就越準確。

加入含有總大腸菌群細菌的水樣，放入程控定量封口機中，目標細菌在MinimalMediumONPG-MUG培養(yǎng)基中36℃培養(yǎng)，總大腸菌群細菌產(chǎn)生的特異性生物酶β一半乳糖苷酶能分解MinimalMediumONPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG,使培養(yǎng)呈現(xiàn)黃色；同時水樣中大腸埃希氏菌產(chǎn)生特異性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal?Medium?ONPG-MUG培養(yǎng)基中的熒光底物MUG，產(chǎn)生特征性熒光。

同樣原理，耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)在44.5℃培養(yǎng)時會分解MinimalMediumONPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG，使培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色。9900Z?SEALER?PLUS: 智能程控定量封口機配合51孔定量盤或97孔定量盤提供簡單、快速、準確的定量檢測總大腸菌群、大腸埃希氏菌、糞（耐熱）大腸菌群、腸球菌和綠膿假單胞菌的實驗方案。51孔定量盤和97孔定量盤是基于傳統(tǒng)方法最大可能數(shù)(MPN)統(tǒng)計模型而設計的半自動定量方法。程控定量封口機自動將樣品／試劑混合液分配到獨立孔中。培養(yǎng)結束后，陽性孔數(shù)可以轉化為MPN值。51孔定量盤可檢測每100mL水樣中1-200MPN值。97孔定量盤可檢測每100mL水樣中1-2,419MPN值。整個檢測過程手工操作時間小于1分鐘。

【使用方法】

定性測試：

第一步、在100ml水樣中加入試劑，溶解，36℃培養(yǎng)24h；

第二步、結果判讀

無色=陰性

黃色=總大腸菌群陽性

黃色+熒光=大腸埃希氏菌群陽性

注：耐熱大腸群菌（糞大腸菌群）需44.5℃培養(yǎng)24h后，觀察黃色為陽性

第一步、在100ml水樣中加入試劑，溶解；

第二步、倒入51孔定量檢測盤（定量孔板）或97孔定量檢測盤（定量孔板）中；

第三步、用程控定量封口機對定量檢測盤（定量孔板）進行封裝，36℃培養(yǎng)24h；

第四步、51孔定量檢測盤（定量孔板）結果判讀：

無色=陰性

黃色格子=總大腸菌群陽性

黃色+熒光格子=大腸埃希氏菌群陽性

查對照MPN表計數(shù)

注：耐熱大腸群菌（糞大腸菌群）需44.5℃培養(yǎng)24h后，觀察黃色格子為陽性結果，查對照MPN表計數(shù)。